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CD 标记物检测板

CD 是“cluster of differentiation”(分化簇)的缩写。CD 分子是细胞表面标记物,对于识别和鉴定白细胞以及白细胞的不同亚群非常有用。成立于 1982 年的 HLDA(人类白细胞分化抗原)研讨会制订了 CD 命名规则,并且此后一直在维护 CD 标记物名单。CD 命名规则背后的最初理念是将抗白细胞表面分子的不同单克隆抗体进行分类,这些抗体种类繁多,产生于世界各地的不同实验室。CD 标记物的数量不断增多,并且已扩展到其他细胞类型。目前在人类中已鉴定超过 320 种 CD 簇。请访问 www.hcdm.org 了解更多信息并查看详尽的 CD 标记物名单。

在使用流式细胞仪进行白细胞群识别时,CD 标记物特别有用。我们的资料页面“General flow cytometry protocol”(常规流式细胞仪方案)以及“What is flowcytometry?”(什么是流式细胞仪?)简要介绍了关于流式细胞仪的知识。流式细胞仪的巨大优势是可以在同一时间检测单个细胞的多个标记物。使用现代流式细胞仪可以在同一个样本上轻松测量 8 到 10 种不同的颜色,最先进的细胞仪甚至可以一次测量最多 18 个通道。


用于流式细胞仪的最常见 CD 标记物列表

*(括号中的链接表示我们无法保证所述的标记物是特定物种细胞群的最佳界定标记物)

Cell type
click antigen for available products
Human Mouse Rat Cow Horse Pig Dog Monkey/ Primate
LeukocyteCD45CD45CD45CD45CD45CD45CD45CD45
T-Cells (generell)CD3CD3CD3CD3CD3CD3CD3CD3
T-Helper CellsCD4CD4CD4CD4CD4CD4CD4CD4
Cytotoxic T-CellsCD8CD8CD8CD8CD8CD8CD8CD8
Natural Killer CellsCD56CD335(CD56)(CD56)(CD56)(CD56)
B CellsCD19
CD20
CD19
CD20
CD19(CD20)(CD20)(CD19)(CD20)
Dentritic CellsCD11cCD11c(CD11c)CD11c(CD11c)
Monocytes / MacrophagesCD14
CD33
CD11b
F4/80
(CD11b)
(Macrophage marker)
(Macrophage marker)(Macrophage marker)(Macrophage marker)(Macrophage marker)(CD33)
(Macrophage marker)
GranulocytesCD66bLy6G
Ly6G/C
Hematopoetic stem cellsCD34CD34(CD34)(CD34)(CD34)
PlateletsCD41
CD61
CD41
CD61
CD61CD41
CD61
CD41
CD61
CD41
CD61
CD41
CD61
CD41
CD61
ErythrocyteCD235aCD235aCD235a
Endothelial cellsCD146CD146(CD146)(CD146)(CD146)


使用 CD 标记物确定白细胞群

使用流式细胞仪确定特定白细胞群时,通常会联用多个 CD 标记物来确定亚群,因为一个单独的标记物通常不足以界定整个细胞群。在评估流式细胞仪实验时,研究通常会得出设门树。

CD8 的分布是一个非常直观的示例。CD8 是最显著的标记物,也称为 CD8 阳性 (CD8+) 细胞毒性 T 细胞,并且由自然杀伤细胞(NK 细胞)和树突细胞 (DC) 表达。如果所有 CD8+ 细胞均由血样的白细胞群设门,则被设门的细胞群将包含 CD8+ T 细胞、NK 细胞和 DC。

以下实验确定了辅助性 CD4+ T 细胞与 CD8+ 细胞毒性 T 细胞的比率。首先,对外周血样的所有 CD45+ 细胞(一般白细胞标记物)进行设门(第 1 个门)。

在下一个检测板,对第 1 个门的所有 CD45+ 细胞进行印迹检测,以检查 CD3 表达情况。CD3 是最常见的 T 细胞标记物,只由 T 细胞表达,不由 NK 细胞或 DC 之类的其他 CD8+ 细胞表达。通过对 CD3+ 细胞设门,可以保证不会有 CD3- 细胞被计为 CD8+ T 细胞,而只有 CD8+ 细胞(例如 NK 细胞或 DC)被计为 CD8+ T 细胞。

CD3+ T 细胞群可以进一步分化为 CD8+ 细胞毒性 T 细胞和 CD4+ 辅助性 T 细胞,如检测板 2 所示,在该检测板中,对第 2 个门的 CD3+ 细胞进行印迹检测,以检查它们的 CD4 和 CD8 表达情况。在检测板 3 中,CD4+ CD8- 辅助性 T 细胞在左上象限中,CD4- CD8+ 细胞毒性 T 细胞在右下象限中。

如有必要,对不同的辅助性 T 细胞群(如 TH1、TH2、TH9、TH17 和调节性 T 细胞)感兴趣的研究者可以进行染色,以检查这些亚群各自的额外或细胞内标记物。

Flow cytometry image